Investigação e produção integrada de Artemisia annua L. e antimaláricos a base de artemisinina e seus derivados

Abstract

Neste trabalho, foram estabelecidas culturas in vitro a partir de sementes híbridas (variedade chinesa e vietnamita) de Artemisia annua L. tendo-se registado elevado grau de variabilidade intra-específica, relativamente à germinação das sementes e subsequente desenvolvimento das plântulas in vitro, variabilidade essa já anteriormente referenciada por vários autores. Os ensaios de micropropagação revelaram diferentes comportamentos das plântulas dependendo da temperatura, tipo de explante e sua proveniência. Foram efectuadas extracções de constituintes de A. annua por maceração com hexano e extracções líquido/líquido a partir de uma infusão com hexano e pentano. Nalguns casos, as extracções foram assistidas por ultrasons e noutros a extracção foi efectuada em contínuo, em aparelho de Soxhlet (utilizando também hexano). Os extractos foram analisados por GC e GC-MS para detecção, identificação e quantificação da artemisinina e seus derivados. A análise, por GC e GC-MS, do óleo essencial (OE) obtido por hidrodestilação de folhas secas de A. annua colhidas na fase de pré-floração (fase de rendimento máximo em artemisinina) proporcionou a identificação de 43 dos seus constituintes. Demonstrou-se, neste trabalho, que a produção de artemisinina pode ser estimulada por efeito da elicitação, induzida pelo contacto da planta com biomassa inactiva de fungos, reconhecendo-se porém ser necessário um melhor controlo das variáveis nomeadamente da temperatura, uma vez que este factor parece ter influenciado os resultados. A implementação de um projecto de exploração agro-industrial de A. annua para produção, extracção e comercialização de artemisinina na fase final deste trabalho de investigação apresenta-se precoce pois aspectos de extrema importância tais como o comportamento morfo-fisiolólogico e fitoquímico desta planta em solo Angolano não foram ainda estudados.

In this work, in vitro cultures were established from hybrid seeds (A3) of Artemisia annua L. High levels of variability were observed either in terms of seeds germination or in vitro plantlets development as previously referred by some authors. The micropropagation studies have shown differences in the behaviour of plants related to temperature and explant origin. The artemisinin extraction from plants was performed using different techniques, namely infusion followed by liquid-liquid extraction, with hexane and pentane, maceration with hexane. Some extractions were assisted by Ultrasounds and some other ones were performed in continuous for one hour by n-hexane, in Soxhlet apparatus. The resulting extracts were analysed by GC and GC-MS for detection, identification and quantification of artemisinin and its analogues. The essential oil was obtained from A. annua leaves by hydrodestilation and 43 of its constituents were identified by GC e GCMS. It was proved that the artemisinin production can be stimulated by elicitation induced by contact between the plant and the inactive fungal biomass. We recognise however the importance of a better control of temperature and other factors that may have influenced the results. For the implementation of an Agro-industrial exploitation of A. annua envisaging the production, extraction and commercialization of artemisinin in the later stage of this work research, further studies are needed to determine the factors related to the morphophysiologic and chemical behaviour of A. annua in Angolan soil.