Validação de métodos analíticos: determinação da turvação e da clorofila a em águas

Abstract

A poluição ambiental é um dos fatores que contribui para a escassez das águas, sendo necessário a existência de critérios de manutenção permanente da sua qualidade, em conformidade com leis nacionais e internacionais, garantindo a preservação das suas reservas nas próximas gerações. Neste sentido, é recomendado implementar métodos analíticos de quantificação de espécies que comprometem a qualidade da água e comparar com valores estipulados na legislação. Esta dissertação teve como objetivo a implementação, a validação e o controlo de qualidade do método analítico para a determinação da turvação de águas naturais doces segundo a norma EPA Method 180.1 por nefelometria. Foi ainda iniciada a validação do método de doseamento da clorofila a em águas naturais doces segundo a norma NP 4327:1996, recorrendo à espetroscopia de absorção molecular com o método de extração por acetona, assim como o controlo de qualidade interno. Durante a validação destes métodos foram avaliados como parâmetro de desempenho a seletividade, a linearidade, os limiares analíticos a precisão e a exatidão. As estimativas de incerteza associadas às calibrações foram também determinadas e o controlo de qualidade interno foi realizado recorrendo ao uso de cartas de controlo. Ambos apresentam uma boa correlação linear e os limiares analíticos são adequados ao uso. A precisão avaliada em condições de repetibilidade e de precisão intermédia foi satisfatória com coeficiente de variação e erro relativo adequados. A determinação da turvação apresentou taxas de recuperação dentro dos valores estipulados, concluindo que o método é seletivo para as gamas de concentração estabelecida. Na avaliação da exatidão do método recorrendo a um material de referência certificado, obteve-se um valor de Z-score satisfatório. A incerteza do método determinada foi adequada para o uso. Quanto ao método de determinação de clorofila a ainda não foi possível obter resultados para avaliar a exatidão, a seletividade e a incerteza de medição, dado que não se dispõe de materiais de referência certificados, participação em ensaios interlaboratoriais e a realização de ensaios de recuperação ainda está a ser delineada em termos de procedimento.

Environmental pollution is a key factor which contribute to water scarcity, requiring the existence of criteria for permanent maintenance of it is quality, in accordance with national and international laws, warranting the preservation of its reserves in the next generations. In this sense, the implementation of analytical methods for the quantification of species that compromise water quality and the comparison with values stipulated in the legislation is required. In this thesis the implementation, validation and quality control of the analytical method for the determination of natural water turbidity according to EPA Method 180.1 by nephelometry, were performed. The validation of the chlorophyll a quantification method was also initiated in natural waters according to NP 4327:1996, using molecular absorption spectroscopy with the acetone extraction method, as well as the internal quality control. In the validation of these methods, performance parameter such as selectivity, linearity, analytical thresholds, precision and accuracy were characterizated. The uncertainty associated to calibrations curves were also determined and the internal quality control was performed using control charts. Both calibrations presented good linear correlation and analytical thresholds are suitable for use. The precision evaluated under repeatability and intermediate precision conditions was appropriate with variation coefficient and relative error less than adequate. The turbidity method showed recovery rates within the demanded values, demonstrating its selectivity for the established concentration ranges. The method accuracy was evaluated using a certified reference material, and a satisfactory Z-score value was obtained. The uncertainty of the method was suitable for use. Regarding the quantification method for chlorophyll a, accuracy, selectivity and measurement uncertainty were not evaluated since no certified reference materials, or participation in interlaboratory tests or recovery assays were available.