Acinetobacter calcoaceticus plays a bridging function in drinking water biofilms

Abstract

Intergeneric coaggregation of six drinking water autochthonous heterotrophic bacteria isolated from a model laboratory system were tested for their ability to coaggregate by a visual assay and by two microscopic techniques (epifluorescence and scanning electron microscopies). One isolate, identified as Acinetobacter calcoacticus, was found not only to autoaggregate, but also to coaggregate with four of the five other isolates (Burkholderia cepacia, Methylobacterium sp., Mycobacterium mucogenicum, Sphingomonas capsulata and Staphylococcus sp.) to different degrees as assessed by the visual assay, highlighting a possible bridging function in a biofilm consortium. In its absence, no coaggregation was found. Microscopic observations revealed a higher degree of interaction for all the aggregates than did the visual assay. Heat and protease reversed autoaggregation and coaggregation, suggesting that interactions were lectin-saccharide mediated. The increase/decrease in the level of extracellular proteins and polysaccharides produced during intergeneric bacteria association was not correlated with coaggregation occurrence, but probably with coaggregation strength. The bridging function of A. calcoaceticus was evidenced by multispecies biofilm studies through a strain exclusion process.

Este trabalho investiga a co-agregação intergenérica de seis bactérias heterotróficas autóctones de água potável isoladas de um sistema laboratorial modelo, testando assim a sua capacidade de co-agregação através do ensaio visual e de duas técnicas microscópicas (microscopia de epifluorescência e microscopia electrónica de varrimento). Para o isolado identificado como Acinetobacter calcoaceticus, foi detectado através do ensaio visual que não só auto-agrega, mas também co-agrega, a diferentes intensidades, com quatro dos outros cinco isolados (Burkholderia cepacia, Methylobacterium sp., Mycobacterium mucogenicum, Sphingomonas capsulata and Staphylococcus sp.), realçando a possível função de ligação em biofilmes multi-espécie. Na sua ausência não foi detectada co-agregação. As observações microscópicas revelaram um maior grau de interacção para todos os agregados do que a detectada pelo ensaio visual. O tratamento com calor e protease reverteram a auto-agregação e a co-agregação, sugerindo que as interacções são mediadas por lectinas-açúcares. O aumento/diminuição no nível de proteínas e polissacarídeos extracelulares produzidos durante os fenómenos de co-agregação não estão relacionados com a sua ocorrência, mas provavelmente com a sua força de interacção. A função de ligação da A. calcoaceticus nos consórcios microbianos foi evidenciada pela formação de biofilmes multi-espécie, através de um processo de exclusão bacteriana.