Expressão dos genes GUP1 e GUP2 de Saccharomyces cerevisiae: influência da fonte de carbono e do stresse salino

Abstract

Dois genes com elevado grau de homologia relacionados com um fenótipo de resistência a stress salino foram identificados em Saccharomyces cerevisiae1. A análise da actividade transportadora com glicerol radioactivo, permitiu estabelecer a função de transporte transmembranar de glicerol para estes dois genes: GUP1 e GUP2 (glycerol uptake). Em células cultivadas em etanol, a actividade de simporte com protões foi atribuida a Gup1p, enquanto que em células cultivadas em glucose nenhuma estirpe exibiu transporte de glicerol. O mutante duplo gpd1gpd2, assim como outros mutantes afectados em pelo menos um gene GPD, uma vez cultivados em glucose na presença de NaCl, exibiu uma actividade transportadora inesperadamente elevada2. Uma mutação adicional nestas estirpes no gene GUP1 reduziu esta actividade para cerca de 50%. A actividade restante foi atribuida a Gup2p. A expressão destes dois genes foi estudada por RT-PCR na estirpe selvagem e na estirpe gpd1gpd2. Os resultados revelaram níveis significativos de mRNA para GUP1 e GUP2 em células desreprimidas e em células cultivadas em glucose. Os níveis de mRNA de GUP1 aumentam em maior grau em estirpes afectadas nos genes GPD, particularmente em células cultivadas em glucose com NaCl (1M) e glicerol (15mM), enquanto que os maiores níveis de mRNA de GUP2 foram observados em células cultivadas em sal sem glicerol. Estes resultados sugerem mecanismos de regulação diferentes para a transcrição de GUP1 e GUP2. Por outro lado, os resultados também indicam a existência de mecanismos póstranscrição de regulação da actividade transportadora de glicerol. 1 - HØlst, B. et al. (2000) Mol. Microbiol, 37:98-107 2 – Lages, F. and Lucas, C. (1997). Bioch. Biophys Acta, 1322: 8-18