Síntese de derivados de purina, análise SAR em Saccharomyces cerevisiae e Candida albicans e rastreio fármaco-genómico em Saccharomyces cerevisiae

Abstract

Anualmente, as doenças infeciosas são responsáveis por cerca de 15 milhões de mortes a nível mundial, entre as quais se incluem as infeções fúngicas. O aparecimento de estirpes multirresistentes tem contribuído para a necessidade de desenvolver novos compostos com atividade antifúngica. Neste trabalho, 6-amino-2-(hidroxifenil) ou 2-(polihidroxifenil)-9-arilpurinas foram sintetizadas por reação de 4-amidino-5-aminoimidazoles com aldeídos fenólicos. A purificação dos novos compostos por cromatografia em flash seca contribuiu para os baixos rendimentos. Adicionalmente, 6-amino-9- arilpurinas com protão em C2 foram sintetizadas com elevados rendimentos. A atividade antifúngica dos compostos foi avaliada em Sacchamoryces cerevisiae e Candida albicans. Foram identificados quatro derivados de purina com atividade contra S. cerevisiae. Os derivados de purina com morfolina ou piperidina em C6 e o substituinte 3,4,5-trihidroxifenilo em C2 revelaram ser os mais ativos (MIC = 25 μM). Os estudos SAR mostraram que a atividade depende dos substituintes presentes em C2 e C6 do anel de purina. Baseado num rastreio fármaco-genómico utilizando uma coleção de mutantes de S. cerevisiae da Euroscarf, foram identificados 95 genes envolvidos na sensibilidade e 223 na resistência a um derivado de purina ativo. “Enrolamento e modificação de proteínas” foi a categoria funcional mais representada tanto nas estirpes resistentes como nas sensíveis. O vacúolo, o budding, a polaridade celular e a formação de filamentos também se encontram afetados pela presença do derivado de purina.

Every year, approximately 15 million deaths worldwide are caused by infectious diseases, including fungal infections. The emergence of multidrugresistant strains has increased the need for developed of new antifungal drugs. In this work, 6-amino-2-hydroxyphenyl or 2-polihydroxyphenyl-9- arylpurines were synthetized by reaction of 4-amidino-5-aminoimidazoles with phenolic aldehydes. The purification of new compounds by dry flash chromatography led to the isolation of products in low yield. In addition, 6- amino-9-arylpurines with a proton in C2 were synthesized in high yields. The compounds were screened for antifungal activity against Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans. We identify four purine derivatives with activity against S. cerevisiae. The purine derivatives with morpholine or piperidine as the C6 substituents and 3,4,5-trihydroxyphenyl substituent in C2 were highly active against the yeast (MIC = 25 μM). SAR studies show that activity depends on the substituents present in C2 and C6 of the purine core. Based on chemical genomics screen with Euroscarf mutants collection of S. cerevisiae, we identified 95 genes involved in the sensitivity and 223 in the resistance of an active purine derivative. The main function category that showed sensitivity and resistance to the presence of purine derivative was “folding and modification of proteins”. The vacuole, the budding, the cell polarity and the filament formation were also affected by the presence of purine derivative.